Na czym polega chromatografia cieczowa? – Urządzenia HPLC

Jedną z popularnych technik analitycznych i preparatywnych wykorzystywanych do badania czystości oraz identyfikacji próbek analizowanych substancji chemicznych jest chromatografia cieczowa (LC). Na czym polega ta technika? Jakie urządzenia wykorzystywane są w trakcie badania próbki przy użyciu chromatografii cieczowej? Odpowiedzi na te pytania znajdziesz w dalszej części artykułu.

Czym wyróżnia się chromatografia cieczowa?

Chromatografia to technika wykorzystująca różnicę w zachowaniu poszczególnych związków znajdujących się w układzie dwufazowym. Początkowo niedoceniana, obecnie należy do najbardziej rozpowszechnionych metod instrumentalnych wykorzystywanych w chemii analitycznej. Poza mieszaniną poddawaną rozdzieleniu, w układzie chromatograficznym znajduje się również faza stacjonarna (ciało stałe lub ciecz) oraz faza ruchoma (gaz, ciecz lub płyn w stanie nadkrytycznym). Faza stacjonarna nie zmienia swojego położenia, natomiast faza ruchoma porusza się w określonym kierunku. W porównaniu z innymi formami chromatografii, w chromatografii cieczowej faza ruchoma jest cieczą.

Jak tłumaczy nasz rozmówca, doradca klienta w firmie Spektrometria, która zajmuje się sprzedażą oraz serwisowaniem narzędzi do przeprowadzania kompleksowych badań laboratoryjnych: 

Jedną z odmian chromatografii cieczowej jest wysokowydajna chromatografia cieczowa (HPLC), będąca chromatografią kolumnową. Od klasycznej chromatografii cieczowej odróżnia ją ciśnienie, pod którym mieszanina pełniąca funkcję fazy ruchomej jest kierowana na kolumnę. Ciśnienie to jest w tym przypadku znacznie wyższe. Różnice te wynikają z budowy urządzeń HPLC, które działają dużo sprawniej i szybciej od urządzeń wykorzystywanych podczas rozdzielania substancji w klasycznej chromatografii cieczowej.

Urządzenia wykorzystywane w wysokowydajnej chromatografii cieczowej

Wysokowydajne chromatografy cieczowe umożliwiają precyzyjny podział badanej mieszaniny na poszczególne frakcje lub składniki przed analizą z wykorzystaniem technologii LC-MS lub LC-MS/MS. Dzięki temu zespół laborantów przeprowadzający analizę może bez problemów zidentyfikować konkretne elementy substancji chemicznej znajdującej się w badanej próbce.

W urządzeniach HPLC możliwe jest uzyskanie wyników analiz ilościowych i jakościowych dla wielu badanych substancji w jednym cyklu pomiarowym. Urządzenia te charakteryzują wzmocnione parametry sprawności i rozdzielczości mieszanin znajdujących się w układzie chromatograficznym. Właściwości te przyczyniają się bezpośrednio do znacznie szybszego i sprawniejszego podziału analizowanej mieszaniny przy jednoczesnym mniejszym zużyciu cieczy odgrywającej rolę fazy ruchomej. Chromatografy cieczowe umożliwiają szeroki zakres technologii rozdziału. Urządzenia te można wykorzystać zarówno do przepływów analitycznych, jak i dużo bardziej zaawansowanych mikro- oraz nanoprzepływów.